CELLestialTM 系列产品(二):细胞染色荧光探针

CELLestialTM 产品 --- 活细胞分析用荧光探针和检测试剂盒

美国著名的标记和检测产品公司--ENZO Life Sciences于2007年和2008年分别收购瑞士ALEXIS Biochemicals和BIOMOL International公司后,其荧光技术得到深度和广度上的极大扩充。为适应迅猛发展的活细胞检测需求,ENZO Life Sciences 公司特推出一系列经过严格质控的高质量、高性能荧光探针及检测试剂盒,该类产品的商品名为CELLestialTM,意为细胞必需(Cell Essential)。

CellestialTM产品广泛应用于激光共聚焦、流式细胞术和高内涵筛选(High Content Screening, HCS)等荧光图像分析技术,与市场上的同类商品相比,其具有独特的优越性和更好的稳定性及重复性,非常有助于从时间和空间上高精度地分析亚细胞组织及其动态改变。

产品种类:
离子检测
(Ion Detection)
细胞染色
(Cellular Staining)
pH探针
(pH Indicators)
活性氧检测
(Reactive Oxygen Detection)
活性染料和染色
(Reactive Dyes & Stains)
钙离子探针
(Calcium Detection)
淀粉样蛋白检测
(Amyloid Detection)
pH探针
(pH Indicators)
活性氧检测
(Reactive Oxygen Detection)
氨基反应性
(Amine-Reactive)
氯离子探针
(Chloride Detection)
脂类检测
(Lipid Detection)
    巯基反应性
(Thiol-Reactive)
锌离子探针
(Zinc Detection)
膜电位检测
(Membrance Potential Detection)
     
  线粒体检测
(Mitochrondrial Detection)
     
  神经元检测
(Neuronal Detection)
     
  细胞核检测
(Nuclear Detection)
     

细胞染色 (Cellular Staining)

淀粉样蛋白检测 (Amyloid Detection)

产品名称
目录号
激发波长/发射波长
规格
特性和应用
Congo Red, 超纯
(刚果红)
ENZ-52552
497 nm/614 nm 100 mg 用于弹性纤维和细菌的染色, 显微镜观察; 也常用于对多种病症(如阿尔茨海默病/老年痴呆症, 费特-雅各布氏病和牛海绵状脑病/疯牛病)病变组织中淀粉样蛋白的检测。刚果红染色的淀粉样蛋白在偏振光下呈现"苹果绿"双折射, 使传统的观察有色蛋白沉积法以改善。

脂类检测 (Lipid Detection)

产品名称
目录号
激发波长/发射波长
规格
特性和应用

Nile Red, 超纯
(尼罗红)

ENZ-52551
552 nm/636 nm 25 mg 亲脂性荧光探针, 在疏水环境中呈强荧光, 而在水溶液中荧光很弱; 非常适用于对细胞(如脂肪细胞)内脂滴 (lipid droplets)进行活体的荧光显微镜检测; 尼罗红单染或与抗CD3单抗双标记流式细胞术分析可用于监测外周血白细胞和淋巴细胞的磷酸脂质化作用(phospholipidosis); 尼罗红也用于SDS-PAGE电泳后蛋白的快速染色。

膜电位检测 (Membrane Potential Detection)

产品名称
目录号
激发波长/发射波长
规格
特性和应用
Di-2-ANEPEQ [JPW1114]
ENZ-52201
517 nm/712 nm 5 mg 属ANEP (氨基亚萘酰吡啶)类膜电位荧光染料, 在水溶液中荧光弱, 与脂质(如细胞膜)结合后发射强荧光; 环境中电场的变化可引起该染料荧光发射光谱的相应改变, 因反应迅速, 所以可检测兴奋(excited)细胞 (包括神经元细胞, 心肌细胞和完整的脑)中瞬间的电位改变, 达毫秒级。该染料可通过显微注射等方法直接对脑组织进行染色。
Di-8-ANEPPS
ENZ-52204
498 nm/713 nm 5 mg 属ANEP (氨基亚萘酰吡啶)类膜电位荧光染料, 在水溶液中荧光弱, 与脂质(如细胞膜)结合后发射强荧光; 环境中电场的变化可引起该染料荧光发射光谱的相应改变, 因反应迅速, 所以可检测兴奋(excited)细胞 (包括神经元细胞, 心肌细胞和完整的脑)中瞬间的电位改变, 达毫秒级; Di-8-ANEPPS因带有磺酸基, 因此较其它ANEP类染料对细胞内化的抵抗作用强。

DiBAC4(3), 超纯
(bis-(1,3-dibarbituric acid)-trimethine oxanol)




ENZ-52205
493 nm/516 nm 25 mg

最常用的膜电位检测荧光素, 为敏感的慢反应探针, 结构上属亲脂性羰花青类; DiBAC4(3)本身无荧光, 细胞膜出现去极化时进入细胞, 并与胞浆内蛋白结合后发出荧光, 荧光强度与膜电位的改变程度相关。虽应答膜电位变化发生荧光改变的速度慢于快反应探针 (如ANEP类染料), 但其反应强度明显高于快反应探针; 适于检测不可兴奋细胞(如成纤维细胞, 脂肪细胞和内皮细胞等)在呼吸作用, 离子通道通透性改变, 药物结合和其它因素作用下发生的平均膜电位变化; DiBAC4(3)已用于防御素 (defensins)抗菌活性的流式细胞术检测。

DiIC1(5) 碘化物, 超纯
(1,1’,3,3,3’,3’-hexamethylindodicarbocyanine iodide)

ENZ-52207
638 nm/658 nm 100 mg DiI, DiO, DiD和DiR均为亲脂性羰花青类荧光染料, 可标记细胞膜和其它疏水组织。这些染料在水中为弱荧光, 而当掺入细胞膜或与蛋白质等亲水性生物分子结合后荧光会显著增强; DiIC1(5)用于检测凋亡细胞中线粒体膜电位的丧失, 表现为红色荧光信号的减弱。

DiIC12(3) 高氯酸化物, 超纯
(1,1’-Didodecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)

ENZ-52206
549 nm/565 nm 100 mg

DiI, DiO, DiD和DiR均为亲脂性羰花青类荧光染料, 可标记细胞膜和其它疏水组织。这些染料在水中为弱荧光, 而当掺入细胞膜或与蛋白质等亲水性生物分子结合后荧光会显著增强; DiIC12(3)为常用的神经示踪剂, 可标记神经元突触, 也用于其它细胞(尤其是内皮细胞)的脂双层的标记; DiIC12(3)的毒性很小, 对细胞活性的影响甚微, 可在细胞培养体系内存在数日, 因此适于诸多活细胞实验中的标记。

线粒体检测 (Mitochondrial Detection)

产品名称
目录号
激发波长/发射波长
规格
特性和应用
Dihydrorhodamine 123, 超纯
(二氢罗丹明 123)
ENZ-52302
507 nm/529 nm 10 mg

简称DHR123, 本身无荧光, 在超氧化酶存在时可被过氧化氢 (H2O2)氧化, 转变成发射绿色荧光的罗丹明123 (Rhodamine 123), 因此广泛应用于检测细胞内活性氧(ROS), 如过氧化物, 次氯酸和过氧亚硝基阴离子等; 可与其他荧光 (如细胞受体的荧光标记抗体, 细胞活性探针--碘化丙啶(PI), 或钙离子荧光探针等)联合使用对细胞进行多参数分析。

Rhodamine 123, 超纯
(罗丹明 123)
ENZ-52307
507 nm/529 nm 25 mg

为细胞膜通透的阴离子绿色荧光染料, 能够迅速被活线粒体摄取, 而无细胞毒性; 常与Cy5和AMCA (Aminomethylcoumarin Acetate)等组合进行多色荧光分析, 相互间无颜色交叉; 分析细胞凋亡时, 可用罗丹明123来检测线粒体的膜电位, 而用NAO来检测线粒体结构的完整性。

TMRE, 超纯
(四甲基罗丹明乙酯, 高氯酸盐)
ENZ-52309
549 nm/574 nm 25 mg

为带正电荷的罗丹明类染料(包括罗丹明酯和Rosamine--无2’-羧基的罗丹明等); 选择性定位于线粒体, 因此广泛用于标记活细胞的线粒体; 与JC-1相似, TMRE常用于检测线粒体的膜电位; 除用于特异性标记线粒体, 还有报道采用双光子激光共聚焦技术, 用该染料对灌注大鼠心脏的单个心肌细胞线粒体膜电位进行实时成像分析。

DiOC6(3) 碘化物, 超纯
(3,3’-Dihexyloxacarbocyanine iodide)

ENZ-52303
482 nm/504 nm 100 mg DiI, DiO, DiD和DiR均为亲脂性羰花青类荧光染料, 可标记细胞膜和其它疏水组织。这些染料在水中为弱荧光, 而当掺入细胞膜或与蛋白质等亲水性生物分子结合后荧光会显著增强; DiIC6(3)为绿色荧光膜染料, 主要用于检测活细胞的线粒体膜电位, 也用于对细胞凋亡途径进行多参数流式分析。

JC-1, 超纯
(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’ tetraethylbenzimidazolyl-carbocyanine iodide)




ENZ-52304
515 nm/529 nm 5 mg

广泛用于检测线粒体膜电位, 适用于流式细胞术, 荧光显微镜和微孔板高通量荧光分析; 在正常细胞中, JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物(J-aggregates),发射橙红色荧光(发射波长: 590 nm)。而细胞损伤或其它因素导致线粒体膜电位较低时,JC-1不再能聚集在线粒体的基质中,而是以单体(monomer)形式存在, 其发射绿色荧光(发射波长: 529 nm)。因此可以通过JC-1荧光颜色的转变来监测线粒体膜电位的变化; 与其它常用的线粒体膜电位荧光染料相比, 用JC-1既可定性 (观察橙红色向绿色荧光的转变), 又可定量检测线粒体膜电位 (计算荧光强度的比率)。

JC-10 [增强型JC-1], 超纯




ENZ-52305
510 nm/525 nm 5 mg

JC-10为JC-1的衍生物, 用于检测线粒体膜电位, 适用于流式细胞术, 荧光显微镜和微孔板高通量荧光分析; JC-10相比JC-1最大的优势在于JC-10的溶解性更好, 而且能够检测线粒体膜电位更细微的变化; 在正常细胞中, JC-10聚集在线粒体的基质中,形成聚合物(J-aggregates),发射橙红色荧光(发射波长: 590 nm)。而细胞损伤或其它因素导致线粒体膜电位较低时,JC-1不再能聚集在线粒体的基质中,而是以单体(monomer)形式存在, 其发射绿色荧光(发射波长: 525 nm)。因此可以通过JC-10荧光颜色的转变来监测线粒体膜电位的变化; 与其它常用的线粒体膜电位荧光染料相比, 用JC-1既可定性 (观察橙红色向绿色荧光的转变), 又可定量检测线粒体膜电位 (计算荧光强度的比率)。

NAO, 超纯
(10-壬基吖啶橙溴化物)
ENZ-52306
495 nm/519 nm 25 mg

吖啶橙的衍生物, 主要用于完整细胞中线粒体内膜的荧光标记; NAO可与心磷脂等带负电荷磷脂特异性结合, 其与线粒体膜的相互作用不依赖于线粒体的膜电位; 分析细胞凋亡时, 可用罗丹明123来检测线粒体的膜电位, 而用NAO来检测线粒体结构的完整性。

神经元检测 (Mitochondrial Detection)

产品名称
目录号
激发波长/发射波长
规格
特性和应用
Hydroxystilbamidine, 超纯
(羟脒芪, 也称荧光金Fluoro-GoldTM)
ENZ-52253
385 nm/536 nm 10 mg

为阴离子荧光染料, 常用于神经元逆向示踪标记; 该染料对神经元的逆向标记非常敏感和可信, 荧光强度高且不会发生渗漏; 可通过压力注射法或离子电渗法进入细胞; 该染料兼容于目前大多数常用的神经解剖学技术, 包括免疫荧光, 免疫细胞化学, 放射自显影和基于辣根过氧化酶的免疫组织化学技术(石蜡包埋切片)。

MM1-43(FM1-43), 超纯
(N-(3-triethylammoniumpropyl) -4-(4-(dibutylamino)styryl) pyridinium dibromide)
ENZ-52251
510 nm/626 nm 1 mg

为阴离子染料, 属亲脂性苯乙烯化合物, 插入细胞膜内层后发射强荧光; 在活跃释放神经递质的神经元中, MM1-43可被再循环的突触小泡内吞, 从而使神经末梢深度染色;MM1-43对细胞膜的特异性染色有利于确定活跃放电的神经元和探讨活性依赖的囊泡循环机制(activity-dependent vesicle cycling)。

MM4-64(FM4-64)
(N-(3-triethylammoniumpropyl) -4-(6-(4-(diethylamino) phenyl)hexatrienyl)pyridinium dibromide)
ENZ-52252
558 nm/734 nm 1 mg

为阴离子染料, 属亲脂性苯乙烯化合物; MM4-64作为活细胞染料, 主要用于追踪酵母膜的大量内吞以及向液泡(vacuole)的转运; MM4-46也是液泡动态改变的敏感监测染料, 可检测有丝分裂过程中分隔结构的形成, 液泡分裂/融合, 和不同类型液泡蛋白分选突变体的液泡形态等。

细胞核检测 (Nuclear Detection)

产品名称
目录号
激发波长/发射波长
规格
特性和应用
Acridine Orange(AO), 超纯
(吖啶橙)
ENZ-52405
500 nm/525 nm(DNA)
460 nm/650 nm(RNA)
100 mg

AO为核酸特异性阴离子荧光染料, 用于细胞周期分析时区分G0和G1期; AO具细胞膜通透性, 与DNA或RNA通过插入或静电吸引相互作用; AO与DNA结合后A结合后, 最激发和发射光谱类似于荧光素(Fluorescien), 即最大激发波长为502 nm, 最大发射波长为525 nm(绿光)。而与RNA结合后最大激发波长和最大发射波长分别迁移为460 nm(蓝光)和650 nm(红光)。因此通过发射光中的红光和绿光可分析细胞周期及鉴别是否发生RNA的复制(G0期的特征); AO也常用于对酸性细胞器, 如溶酶体等进行非特异性染色; AO也用于落射荧光显微镜技术(epifluorescence microscopy)。

DAPI, 超纯
(4’,6’-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride)
ENZ-52404
358 nm/461 nm 100 mg

DAPI为核酸特异性荧光染料, 对DNA具有很高的亲合力, 广泛用于流式细胞术, 荧光显微镜和微孔板高通量荧光分析; DAPI具有膜通透性, 可很好的检测活细胞、死细胞和固定的细胞; DAPI为紫外光(UV)激发, 发射蓝光, 因此可与荧光素(Fluorescien)、绿色荧光蛋白(GFP)、或Texas Red(德克萨斯红)等荧光染料合用进行多参数分析; DAPI也用于检测细胞培养体系中的支原体或病毒DNA。

Hoechst 33258,, 超纯

ENZ-52402
352 nm/461 nm 100 mg

为DNA荧光染料, 用于荧光显微镜和流式细胞术分析细胞周期和监测DNA凝集, 在活细胞和固定的细胞中均适用; 该染料对细胞膜的通透性弱于其它Hoechst衍生物, 如Hoechst 33342等, 但通过制作荧光发射强度对DNA含量的标准曲线(standard emission-to content curve)可用于定量检测。

Hoechst 33342,, 超纯

ENZ-52401
350 nm/461 nm 100 mg

为DNA荧光染料, 用于荧光显微镜和流式细胞术分析细胞周期和监测DNA凝集, 在活细胞和固定的细胞中均适用; 额外的乙基使得Hoechst 33342比Hoechst 33258更具亲脂性, 对细胞膜的通透性也更强; 对Hoechst 33342排染是干细胞和化疗耐药肿瘤细胞的共同特征, 因此常用于鉴定SP细胞(side population, 侧群细胞)

Propidium Iodide(PI), 超纯
(碘化丙啶)




ENZ-52403
535 nm/617 nm 100 mg

PI与溴化乙啶(ethidium bromide)的化学结构相似, 均能嵌入核酸的双链, 因此能对核酸进行荧光染色: PI与核酸结合后荧光强度会增强20-30倍, 因此PI对细胞染色后不必洗涤即可检测, 未染色的PI不会影响结合DNA的PI; PI与DAPI和AO(吖啶橙)相似, 也可与RNA结合; PI是细胞膜非通透性染料, 常用于区分死/活细胞及多色荧光分析时的衬染; PI常与Annexin V联合使用来鉴别坏死、凋亡和活细胞; PI适用于荧光显微镜, 流式细胞术和荧光测定术等。

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